Penyelesaian untuk Pengesahan Penyingkiran Pirogen Menggunakan Ketuhar Pensterilan Haba Kering dan Penunjuk Endotoksin
Penyelesaian untuk Pirogen Pengesahan Penyingkiran Menggunakan Ketuhar Pensterilan Haba Kering dan Penunjuk Endotoksin
BETMATObjektif Pengesahan
Dalam pengesahan ini, ketuhar digunakan untuk mensimulasikan keadaan proses pensterilan haba keringDigabungkan dengan penunjuk endotoksin, telah disahkan bahawa prosedur pensterilan haba kering khusus boleh menyingkirkan pirogen (terutamanya endotoksin bakteria) secara berkesan daripada barang yang hendak disterilkan (seperti barang tahan haba termasuk barang kaca dan peralatan logam), memastikan kandungan endotoksin dalam barang yang disterilkan memenuhi keperluan.
Protokol ini terpakai untuk pengesahan pensterilan haba kering dan penyingkiran pirogen untuk peralatan tahan suhu tinggi (contohnya, picagari kaca, gelung penyuntikan keluli tahan karat) menggunakan ketuhar peredaran udara panas untuk pensterilan haba kering di bawah parameter proses tertentu (suhu, masa, dsb.). Penunjuk endotoksin yang digunakan dalam proses pengesahan ialah Vial Cabaran Endotoksin (Penunjuk Endotoksin) dengan tahap endotoksin ≥1000 EU/vial daripada BETMAT Biotechnology, nombor katalog ECV1K.
Persediaan Pra-Pengesahan
3.1 Persediaan Kakitangan
1. Menubuhkan pasukan pengesahan dan menjelaskan tanggungjawab setiap ahli. Pasukan ini merangkumi kakitangan Jaminan Kualiti (QA), kakitangan Kawalan Kualiti (QC), kakitangan teknikal pengeluaran dan kakitangan pengurusan peralatan.
2. Menjalankan latihan untuk ahli pasukan pengesahan. Kandungan latihan merangkumi prinsip pensterilan haba kering dan penyingkiran pirogen, prosedur operasi ketuhar, kaedah penggunaan penunjuk endotoksin, kandungan protokol pengesahan dan keperluan kawal selia yang berkaitan (cth., GMP). Selepas latihan, penilaian hendaklah dijalankan untuk memastikan ahli mempunyai keupayaan untuk menyelesaikan kerja pengesahan.
3.2 Penyediaan Peralatan dan Perkakas
1. Ketuhar: Sahkan bahawa ketuhar telah melengkapkan Kelayakan Peralatan (IQ, OQ) dan prestasinya memenuhi keperluan. Pastikan komponen seperti sistem kawalan suhu ketuhar, kipas edaran dan sistem ekzos kelembapan beroperasi secara normal. Tentukur sensor suhu ketuhar, pastikan sijil penentukuran berada dalam tempoh sah laku dan ketepatan penentukuran memenuhi keperluan pengesahan (cth., ±1℃).
2. Penunjuk Endotoksin: Beli penunjuk endotoksin daripada pembekal yang berkelayakan. Pastikan pembungkusan utuh dan tidak rosak, labelnya jelas (termasuk maklumat seperti tahap endotoksin, nombor kelompok dan tarikh luput), simpannya mengikut syarat yang dinyatakan dalam manual produk (penyejukan pada 2-8℃), dan simpan rekod penyimpanan yang betul.
3. Peralatan Lain: Sediakan reagen LAL (Limulus Amebocyte Lysate) yang diperlukan untuk ujian endotoksin, perakam suhu yang dikalibrasi, pemasa, dll. Semua peralatan hendaklah disahkan bebas pirogen.
3.3 Penyediaan Dokumen
1. Kumpulkan dokumen seperti manual peralatan ketuhar, sijil penentukuran dan rekod penyelenggaraan.
2. Dapatkan manual produk dan Sijil Analisis penunjuk endotoksin.
3. Membangunkan Prosedur Operasi Standard (SOP) untuk ujian endotoksin, menyatakan kaedah, langkah dan kriteria penilaian keputusan untuk ujian endotoksin.
4. Sediakan borang kelulusan protokol pengesahan dan borang rekod pengesahan (cth., rekod pengedaran suhu ketuhar, rekod penempatan dan pemulihan penunjuk endotoksin, rekod ujian endotoksin).
ciri-ciri
-
4.1 Ujian Pengagihan Haba Tanpa Beban
1. Objektif: Mengesahkan keseragaman taburan suhu di pelbagai kawasan ketuhar di bawah keadaan tanpa beban, memastikan tiada zon mati suhu yang jelas dan menyediakan asas untuk pengesahan beban berikutnya.
2. Langkah-langkah Operasi
● Susun prob perakam suhu secara munasabah mengikut saiz dan struktur ketuhar. Biasanya, prob diletakkan di lapisan atas, tengah dan bawah ketuhar, dan di kedudukan hadapan, tengah, belakang, kiri dan kanan setiap lapisan untuk memastikan liputan keseluruhan kawasan kerja berkesan ketuhar. Bilangan prob hendaklah tidak kurang daripada 9 (untuk ketuhar besar, bilangannya boleh ditambah dengan sewajarnya).
● Sambungkan perakam suhu ke komputer, tetapkan selang rakaman (cth., 1 minit), hidupkan ketuhar dan lakukan proses pemanasan, pemeliharaan haba dan penyejukan mengikut parameter proses pensterilan haba kering yang telah ditetapkan (cth., 250℃ selama 30 minit).
● Pantau dan rekodkan data suhu setiap prob dalam masa nyata sepanjang proses. Hentikan rakaman selepas ketuhar menyejuk ke suhu bilik.3. Keputusan Penghakiman: Semasa fasa pemeliharaan haba, suhu semua prob hendaklah berada dalam julat ±3℃ daripada suhu yang ditetapkan (julat sisihan khusus boleh diselaraskan mengikut peraturan atau keperluan produk), dan tempohnya hendaklah mencapai masa pemeliharaan haba yang ditetapkan. Jika ya, ujian pengagihan haba tanpa beban layak. Jika terdapat kawasan di mana sisihan suhu melebihi piawaian, analisis puncanya (cth., kegagalan kipas edaran, penyumbatan saluran udara), ambil langkah pembetulan yang sepadan (cth., membaiki kipas, membersihkan saluran udara), dan jalankan semula ujian pengagihan haba tanpa beban sehingga layak.
-
4.2 Pengagihan Haba Berbeban dan Ujian Penembusan Haba
1. Objektif: Mengesahkan keseragaman taburan suhu di pelbagai kawasan ketuhar apabila barang yang hendak disterilkan dimuatkan, dan memastikan haba dapat menembusi bahagian teras barang yang hendak disterilkan dengan berkesan, supaya setiap bahagian barang yang hendak disterilkan dapat mencapai suhu dan masa pensterilan yang ditentukan.
2. Langkah-langkah Operasi
● Letakkan barang yang hendak disterilkan di dalam ketuhar mengikut kaedah pemuatan pengeluaran sebenar (cth., beban penuh, separuh beban, beban minimum, dsb., termasuk sekurang-kurangnya beban penuh dan keadaan beban terburuk).
● Susun prob perakam suhu pada kedudukan berbeza bagi barang yang hendak disterilkan (cth., bahagian utama seperti permukaan, bahagian dalam dan sudut) dan kawasan yang mewakili di dalam ketuhar. Bilangan prob hendaklah tidak kurang daripada yang digunakan dalam ujian tanpa beban, dan pastikan setiap bahagian utama barang yang hendak disterilkan dipantau oleh prob untuk penembusan haba.
● Hidupkan ketuhar, kendalikannya mengikut parameter proses pensterilan haba kering yang telah ditetapkan dan rekodkan data suhu setiap prob dalam masa nyata.
● Selepas prosedur pensterilan selesai dan ketuhar menyejuk ke suhu bilik, hentikan rakaman, susun dan analisis data suhu.3. Keputusan Penilaian: Semasa fasa pemeliharaan haba, taburan suhu di pelbagai kawasan ketuhar hendaklah memenuhi piawaian ujian taburan haba tanpa beban yang layak, dan suhu bahagian teras barang yang hendak disterilkan hendaklah mencapai suhu pensterilan yang ditetapkan dan mengekalkan masa pemeliharaan haba yang ditentukan. Jika ya, taburan haba yang dimuatkan dan ujian penembusan haba dianggap layak. Jika tidak layak, laraskan kaedah pemuatan, optimumkan parameter proses, atau periksa prestasi peralatan, dan jalankan semula ujian.
-
4.3 Ujian Cabaran Endotoksin
1. Objektif: Gunakan penunjuk endotoksin untuk mensimulasikan pirogen yang mungkin terdapat pada barang yang hendak disterilkan dan sahkan sama ada prosedur pensterilan haba kering dapat mengurangkan endotoksin ke tahap yang selamat (biasanya memerlukan kandungan endotoksin berada di bawah 0.1 EU/mL, nilai khusus ditentukan mengikut keperluan produk).
2. Langkah-langkah Operasi
● Penyediaan Penunjuk Endotoksin: Selaras dengan keperluan manual produk penunjuk endotoksin, rawat penunjuk endotoksin dengan sewajarnya (contohnya, pembubaran dan pencairan; penunjuk endotoksin daripada BETMAT Biotechnology boleh digunakan secara langsung) untuk memastikan ketepatan dan keseragaman kepekatan endotoksin.
● Penempatan Penunjuk Endotoksin: Letakkan penunjuk endotoksin pada kedudukan dengan suhu yang lebih rendah atau penembusan haba yang lebih perlahan (iaitu, kedudukan terburuk) yang dikenal pasti dalam ujian pengagihan haba yang dimuatkan dan penembusan haba, serta pada bahagian utama barang yang hendak disterilkan. Letakkan sekurang-kurangnya 2 penunjuk endotoksin pada setiap titik penempatan. Sementara itu, sediakan kawalan positif (penunjuk endotoksin yang tidak disterilkan) dan kawalan negatif (Air Reagen LAL) di luar ketuhar.
● Proses Pensterilan Haba Kering: Mulakan ketuhar, lakukan operasi pensterilan mengikut parameter proses pensterilan haba kering yang telah ditetapkan. Semasa proses, rekodkan data suhu mengikut keperluan agihan haba yang dimuatkan dan ujian penembusan haba untuk memastikan proses pensterilan memenuhi keperluan proses.
● Pemulihan Penunjuk Endotoksin: Selepas prosedur pensterilan selesai, keluarkan penunjuk endotoksin dari ketuhar apabila ketuhar menyejuk ke suhu yang sesuai (contohnya, di bawah 40℃), labelkannya dengan betul untuk mengelakkan kekeliruan.
● Ujian Endotoksin: Selaras dengan SOP untuk ujian endotoksin, gunakan reagen LAL untuk menguji penunjuk endotoksin yang diperoleh, kawalan positif dan kawalan negatif untuk endotoksin. Kaedah ujian boleh merangkumi kaedah gel-gumpalan atau kaedah fotometrik. Untuk kaedah gel-gumpalan, reagen LAL dengan kepekaan 0.06 EU/mL boleh digunakan. Untuk kaedah fotometrik, kit ujian endotoksin yang menggunakan kaedah turbidimetrik kinetik atau kaedah kromogenik kinetik boleh digunakan.3. Penghakiman Keputusan
● Kawalan negatif tidak boleh menunjukkan sebarang tindak balas endotoksin (contohnya, tiada pembentukan gel dalam kaedah gel-gumpalan, nilai pengesanan di bawah had pengesanan dalam kaedah fotometrik), dan kawalan positif hendaklah menunjukkan tindak balas endotoksin yang jelas (contohnya, pembentukan gel yang kukuh dalam kaedah gel-gumpalan, nilai pengesanan lebih tinggi daripada ambang yang sepadan dengan kepekatan kawalan positif). Jika tidak, keputusan ujian tidak sah, dan ujian cabaran endotoksin hendaklah dijalankan semula.
● Semua penunjuk endotoksin Pensterilan haba kering tidak akan menunjukkan sebarang tindak balas endotoksin dalam ujian tersebut, iaitu kandungan endotoksin berada di bawah paras selamat yang ditetapkan. Jika ya, ujian cabaran endotoksin layak, menunjukkan bahawa prosedur pensterilan haba kering boleh menyingkirkan pirogen dengan berkesan. Jika mana-mana penunjuk endotoksin menunjukkan keputusan ujian positif, analisis puncanya (contohnya, penempatan penunjuk endotoksin yang tidak betul, parameter proses pensterilan yang tidak mencukupi, kegagalan peralatan), ambil langkah pembetulan yang sepadan, dan jalankan semula ujian cabaran endotoksin sehingga layak.
5.1 Penghakiman Keputusan Pengesahan
Nilaikan secara komprehensif keputusan ujian pengagihan haba tanpa beban, ujian pengagihan haba bermuatan dan penembusan haba, serta ujian cabaran endotoksin. Jika semua item ujian memenuhi piawaian yang telah ditetapkan, pensterilan haba kering semasa dan pengesahan penyingkiran pirogen layak, dan prosedur pensterilan haba kering ketuhar boleh digunakan untuk penyingkiran pirogen item yang dinyatakan untuk disterilkan. Jika mana-mana item ujian tidak layak, jalankan penyiasatan sisihan, bangunkan dan laksanakan langkah pembetulan, dan jalankan semula ujian yang berkaitan sehingga semua item layak.
5.2 Penyediaan Laporan Pengesahan
Selepas kerja pengesahan selesai, pasukan pengesahan hendaklah mengumpul dan menyusun semua data dan rekod pengesahan, dan menyediakan laporan pengesahan. Laporan pengesahan hendaklah merangkumi kandungan berikut:
1. Objektif, skop dan asas pengesahan (peraturan, piawaian, SOP, dll. yang berkaitan).
2. Ahli pasukan pengesahan dan tanggungjawab mereka.
3. Persediaan pra-pengesahan (latihan kakitangan, penyediaan peralatan dan perkakas, penyediaan dokumen, dll.).
4. Langkah-langkah operasi terperinci, data ujian, analisis keputusan dan pertimbangan untuk setiap item pengesahan.
5. Penyimpangan (jika ada): Huraian terperinci tentang penyimpangan yang berlaku semasa proses pengesahan, termasuk masa, lokasi, fenomena penyimpangan, analisis punca, langkah pembetulan dan kesan pelaksanaan.
6. Kesimpulan pengesahan: Nyatakan dengan jelas sama ada prosedur pensterilan haba kering layak dan sama ada ia boleh digunakan untuk penyingkiran pirogen bagi barang-barang tertentu yang hendak disterilkan.
7. Cadangan: Berdasarkan keputusan pengesahan, kemukakan cadangan untuk penyelenggaraan seterusnya, kitaran pengesahan semula, dsb.
8. Lampiran: Termasuk borang kelulusan protokol pengesahan, pelbagai borang rekod pengesahan, sijil penentukuran peralatan, manual produk penunjuk endotoksin, laporan ujian endotoksin, dsb.
Selepas penyediaan laporan pengesahan, ia hendaklah disemak dan diluluskan mengikut proses kelulusan dokumen syarikat. Laporan pengesahan yang diluluskan hendaklah diarkibkan dan diuruskan oleh jabatan QA.
6.1 Pengesahan Semula
1. Pengesahan semula pensterilan haba kering dan penyingkiran pirogen hendaklah dijalankan dalam keadaan berikut:
● Penyelenggaraan atau pengubahsuaian utama ketuhar (cth., penggantian tiub pemanasan, kipas edaran, sistem kawalan suhu, dsb.).
● Perubahan ketara dalam jenis, spesifikasi atau kaedah pemuatan barang yang hendak disterilkan.
● Perubahan dalam parameter proses pensterilan haba kering (cth., suhu, masa).
● Pengesahan semula berkala: Biasanya dijalankan sekali setahun. Kitaran khusus boleh dilaraskan mengikut kekerapan penggunaan ketuhar, status penyelenggaraan dan data pengesahan sejarah, tetapi tidak boleh melebihi 2 tahun paling lama.
2. Kandungan pengesahan semula boleh dipermudahkan atau diselaraskan dengan sewajarnya mengikut keadaan tertentu, dengan tumpuan kepada perkara utama yang mungkin menjejaskan kesan pensterilan (contohnya, pengagihan haba yang dimuatkan dan ujian penembusan haba, ujian cabaran endotoksin).
6.2 Pemantauan Harian
1. Setiap kali ketuhar digunakan untuk pensterilan haba kering dan penyingkiran pirogen, pengendali hendaklah beroperasi mengikut prosedur operasi ketuhar dan merekodkan parameter operasi ketuhar (cth., suhu, masa, status pemuatan, dsb.).
2. Menjalankan penyelenggaraan berkala pada ketuhar, melakukan pembersihan, pelinciran, pemeriksaan dan kerja-kerja lain mengikut pelan penyelenggaraan peralatan dan menyimpan rekod penyelenggaraan yang betul.
3. Kalibrasi sensor suhu dan perakam suhu ketuhar secara berkala untuk memastikan ketepatannya memenuhi keperluan. Kitaran kalibrasi hendaklah dilaksanakan mengikut peraturan yang berkaitan atau manual peralatan (biasanya sekali setiap 3-6 bulan).
4. Lakukan persampelan rawak barang yang telah disterilkan untuk ujian endotoksin bagi memantau kesan pensterilan. Jika ujian endotoksin didapati tidak memenuhi syarat, hentikan penggunaan ketuhar dengan segera, jalankan penyiasatan penyimpangan dan ambil langkah pembetulan, dan jalankan pengesahan semula jika perlu.